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現代固態發酵技術工藝(yì)、設備及應(yīng)用(yòng)研究進展
發布:sungodbio   瀏覽:5265次

前(qián)言

固態發酵(Solidstatefermentation)指體係在沒有(yǒu)或幾乎沒有自由水存在下,微生物在固態物質(zhì)上生長的過程,過程中維持微 生物活性需要的水主要為結合水或與固體基質結(jié)合的狀態。大部分研究者認為固態發酵和固(gù)體基質發酵 (Solidsubstratesfermentation)是同一概(gài)念,可是Pandey等[1]卻認為固(gù)體基質發(fā)酵是在無自由水條件下固體基質作為(wéi)碳 源或氮源的(de)發酵過程,而固態發酵是在無自由水條件下利用天然或惰性底物(如合成泡沫)作為支持物的發酵過程。本(běn)文中將其統(tǒng)稱為固態發(fā)酵(jiào)。

近幾年來,隨著世界性的能(néng)源危機和環境保護意識的增強,固態發(fā)酵重新受(shòu)到重視,主要(yào)歸因於農業、工業廢棄物在固態發酵方麵得(dé)到較大應用,比如(rú)土壤(rǎng)修複(fù)、生物轉化(huà)及生物(wù)燃料等,是工業應(yīng)用的理想技術。

1   影響固態發酵的因素

影響固態發酵過程的因素很多,主(zhǔ)要取決於基質類型(xíng)、微生物選取和生產規模,可大致分為生物化學、物理化學和環境因素。所有的因素都是密切相(xiàng)關(guān) 的,不(bú)能獨立地看待。在特定的固態發酵過程中(zhōng),單個因素(sù)作(zuò)為生化還是物化因素需要區(qū)別(bié)開來。某個因素(sù)在生化(huà)反應(yīng)中可看做獨立的(de),但在物(wù)化反應中是相互影響 的,反之亦然[。所以,需要分(fèn)析各個因素在固態發酵進程中的影(yǐng)響。

1.1  固態發酵微生物

真菌和細菌(jun1)是固態發酵使(shǐ)用較多的微生物,

真菌是比(bǐ)較理想的(如圖所示,真菌菌絲穿過基質的皮殼到達澱粉顆粒)。接種真菌孢子較(jiào)營養細胞有一定優勢:接種方便、靈活且易於保(bǎo)存(cún)較長時間(jiān)和 較高(gāo)活性,但也(yě)有一定的缺點,如較長的(de)滯後期、孢子接種量較(jiào)大;在孢子萌發之前需誘導孢(bāo)子進入代(dài)謝活動和酶係合成(chéng)以防孢子休眠。某些發(fā)酵過程(chéng)需要菌絲接 種,如將毛(máo)殼(ké)菌菌絲接入(rù)小麥秸稈中進行固態發酵。接種密度(個/克物料)也是固態發酵的一個重要(yào)影響因子。

 

1.2  水分和水活度

底物含水量的變(biàn)化(huà)對微生物的(de)生長及代謝能力有(yǒu)重要影響。低水分將降低營養物質傳輸、微生物生(shēng)長、酶穩定性和(hé)基質膨脹;高水分將導致顆粒結塊、通氣不暢和染菌。固態(tài)發酵過程中水分含量範圍應控製在30%~85%。不同微生物發酵水分應該是不同的。

微生物能否在底物上生長取決於該基質的水活度Aw。水活度除受基質本身的影響外,還與溶質的種(zhǒng)類和數(shù)量有關。不同微生(shēng)物Aw要(yào)求也不同。一般而 言,細菌要求Aw在0。90~0。99之間;大多(duō)數酵母(mǔ)菌要求Aw在0。80~0。90;真菌及少數酵母菌(jun1)要求Aw在0。60~0。70。因此,固態發(fā)酵 常用真菌原因就是其對水活度要求低,可以降低雜菌的汙染(rǎn)。在固(gù)態發(fā)酵過程中,由於基(jī)質(zhì)的水解(jiě),物質(zhì)的溶出,Aw降低,將(jiāng)延長微生物的滯後期(qī),導致生物量(liàng)減 少。可以通過加無菌水、加(jiā)濕空氣和(hé)安裝噴濕器等方法來提高Aw,以保證菌體正常生(shēng)長。

1.3  基質和粒度

固態(tài)發酵基(jī)質常為農業副產物、天然纖維素、固體廢料等(děng)。具有大(dà)分子結(jié)構的原料其惰性組織將氮源和碳源(yuán)物質緊緊包裹,不利於發酵,因此原料的預處 理是(shì)很重要(yào)的,主要通過(guò)物(wù)理(lǐ)、化(huà)學或者酶水(shuǐ)解等方法降低被包裹或顆粒粒度,提高基質可利用率。采用天然基質進行(háng)固(gù)態發酵,隨著微(wēi)生物的生長,作為基質結構 的部分碳(tàn)源物質被消耗,影響(xiǎng)了傳質和傳(chuán)熱(rè),通常在發(fā)酵過程中加入適量的具有穩定結(jié)構的支持物來改善。

基質粒度關係到(dào)微生物生長及傳質傳熱效果,將直接影響到單位體積顆粒所能提供的反應表麵積的大小,也會影響到菌體是(shì)否容易進(jìn)入基質顆(kē)粒內部及氧 的供給(gěi)速率和代謝產物的移出速率等[9]。小的顆粒可以提供較大微生物攻擊表麵積,提高固態發酵反應速(sù)率,是理(lǐ)想的選擇,但是在(zài)許多情況下太小的顆粒容易 造成(chéng)底物積團,顆粒(lì)間空隙率也(yě)減小,導(dǎo)致阻力增大,對傳熱、傳(chuán)質產生不利的影(yǐng)響,導致微(wēi)生物不良生長;大顆粒由於存在較大間隙有利於提高傳質(zhì)和傳熱效率, 還可提供更好的呼吸及(jí)通氣條件,但微生物(wù)攻擊表麵積較小(xiǎo)。

1.4  O2和CO2濃度

固態發酵(jiào)係統的氣(qì)態環境(jìng)直接(jiē)影(yǐng)響到生物量的大小和酶合成的程度,需要控製(zhì)空氣流動來調整氣態環境。好氧(yǎng)微生物的(de)理論(lùn)呼吸熵(RQ)為1。0,低 於1。0將影響氧氣傳輸,微生(shēng)物生長受到阻礙,通過測(cè)定O2吸收速率(lǜ)和CO2合成速率(發酵(jiào)尾氣分析儀進行在線(xiàn)實時測定),可以判斷微生物的生長(zhǎng)程度(反 應生物量的變化),通過改變O2和CO2的分(fèn)壓大小,可以(yǐ)控製(zhì)微生物的生長和代(dài)謝,進而調節固態發(fā)酵過程。

1.5  溫度和pH值(zhí)

由於微生物的生長、蛋(dàn)白質合成、酶和(hé)細胞(bāo)活性及(jí)代謝產物合成(chéng)對溫度的敏感性,對(duì)溫度的控製很(hěn)重要。大(dà)多數真菌的生長溫度範圍在20~

[5]

55,致死溫度在(zài) 50~60。在發酵過(guò)程中,微生(shēng)物代(dài)謝產生大(dà)量的熱,造成品溫上升很快(有時高達2/h),如果產生的熱(rè)不能及時散去,就會影響孢子發芽、生長和產物產 率。又固態發酵不(bú)同料層的物料溫度不同(在微生物生長對(duì)數期(qī)可超過3/cm),造(zào)成發酵不(bú)均一。因此(cǐ),在固態發酵反(fǎn)應器設計方麵,主要集中在(zài)如何傳熱,到 目前為止,最好的解決辦法是通風。

固態發酵過程中由於代謝活(huó)動,pH值會發生一定變化,最常見的是有機酸的(de)生成,造成pH值(zhí)下降。不同微生物的最適生長pH值是不同的(de),真菌生長 pH值範圍在2。0~9。0,最適範圍在(zài)3。8~6。0;酵母最適範圍在(zài)4。0~5。0。低pH值可以有效地抑製汙染菌的繁殖。對pH值很難采用合適的技 術進行在線測定和控製(zhì),可在發酵原料(liào)中加入具有(yǒu)緩衝(chōng)能力的物質(zhì)(對反應過程無影響)來緩衝pH值的變化(huà)。

1.6  通風和攪(jiǎo)拌

好氧發酵過程中(zhōng)對氧的需求及係(xì)統中傳質、傳熱的需要,通風和攪拌操作有重要的影響。空氣速率增加可提供微生物生長所需氧氣,又可以移除CO2、 揮發(fā)性代謝物和反(fǎn)應熱,但很多因素影響O2的傳輸,如空氣壓力、通氣(qì)率、基質空隙、料(liào)層厚度、培養基水分、反應器(qì)幾何特征及機械攪拌裝置的轉速等。氣流強 度可作為評判通風強弱的標準,通氣質量也很重要(特別是氣體濕度,可改(gǎi)變水活度)。合適的(de)通(tōng)風強(qiáng)度和質量可提高對溫度的控製。

由於基(jī)質的不(bú)均勻性(xìng),通風過程容易造成細胞代(dài)謝發生變化,需要通過攪拌來提高物料發酵、水分、溫度和氣(qì)態環境均一性。在選擇基質時,應考慮基質 特性,避免在攪拌過(guò)程中出現結塊現象,但過分的翻動(dòng)可能損傷菌絲體,抑製菌(jun1)體生長。間歇攪拌較連(lián)續攪拌有較好效果,對菌絲體(tǐ)的(de)生長及其在基質上附著更有 利。

1.7  固態發酵反應器

固態發酵(jiào)反應器是目前限製(zhì)固(gù)態發酵用於(yú)現代生物反應工(gōng)程的一個重要因素。設計反應器需要考慮幾個方麵的問題:滅菌、接種、傳(chuán)質傳熱、取樣、供 氣、參數的測量和控製等。迄今(jīn)為止已有許多類型的固態發酵反應器問世(包括實驗室、中試和工業生產),部分(fèn)用於食用菌、酶製劑、動物飼料和土壤(rǎng)修複等。

1.7.1  淺盤發酵反應器

淺盤發酵反應器是所有反(fǎn)應器類型中最簡單的發酵設備,結(jié)構見圖,是傳統發酵食品的(de)酒曲生產(chǎn)采用的(de)反(fǎn)應(yīng)裝置,但是,散熱主要通過托盤傳導,即使通電冷卻也不足以去(qù)除代謝(xiè)熱(rè)。此外還有傳質傳熱速(sù)率低造成的(de)高汙染風(fēng)險和托盤利用率(lǜ)低等缺(quē)點。

1.7.2  流化床反應器

該反應器主要是(shì)在金屬網(wǎng)或多孔板(bǎn)上鋪置粉粒(lì)狀基質,從底部往上(shàng)吹空氣形成流化層狀態,兩種不同形式的流化床結(jié)構(gòu)見圖。反應器的主要參數是粒(lì)徑(jìng)大 小和顆粒(lì)分布,粒徑分布越狹窄,顆粒越容(róng)易保持流化狀態。反應器采用封閉係統可較好保持無菌狀(zhuàng)態,發(fā)酵完成可提高空氣溫度直接將產品進行幹(gàn)燥回收。這類反 應(yīng)器容積率低。

1.7.3  轉鼓式反(fǎn)應器

其基本形式是(shì)將一(yī)個圓柱形容器支架在一個轉動(dòng)係統上,轉動係統主(zhǔ)要起支撐及提供動力作(zuò)用(yòng),結構示意見圖。轉鼓式發酵器轉動速率一般為 1~16r/min,有的可達到更高轉速,真菌菌絲體的破壞程度對(duì)轉速較敏感。這類反應器重點要(yào)解決好(hǎo)物料結塊和粘壁的問題,其次是(shì)反應器容積率低。增加 破碎板(網)可以解決(jué)結塊問題。

1.7.4  圓盤式反應器

圓盤式反應器底部通常由兩層金屬網製成,無菌空氣由底部均勻進(jìn)入1m左右厚(hòu)的發酵基質。幾個並排的螺旋式攪拌器在以一定(dìng)的速(sù)度水平運動的同時, 還以適當的(de)轉速自轉。在攪拌器(qì)上還有2~3個噴頭(tóu),用於補水,結構(gòu)示意見圖(tú)。本反應器易於放大進(jìn)行工業生產,但不(bú)能進行無菌操作,隻能用(yòng)於自然發(fā)酵和混合 發酵過程。

 

1.7.5其(qí)他

還有根據不同需要製作的不同固態(tài)發酵(jiào)反(fǎn)應器,如氣相雙動(dòng)態固態發酵技術及裝置(zhì)(示(shì)意(yì)見圖。該項技術已成功地從實驗室的2、50、800L放大到25、50、70m3的工業級生產規模。應用(yòng)範圍涉及到抗生素、酶製劑、有機(jī)酸、食品添加劑(jì)、生物農藥和生物肥料等。

 

2  現代固態發酵技術的應用

固態發酵技術在傳統功能食品和酒類釀造方麵得到了廣泛應用,如醬油、米酒、豆豉(chǐ)、黃酒(jiǔ)和白酒等。從傳統固態發酵發(fā)展(zhǎn)到現代固態發酵,該技術在生 產抗生素、酶製劑(jì)、精飼料、有機酸、生物活性物(wù)質等方麵發揮了重大作用(yòng),並進一(yī)步擴大到生物轉化、生物燃料、生物防治、垃圾處理及生物(wù)修複等領域,固態發 酵作為潛在的技術引起人們的密切關注。

2.1  生物轉化

利用固態發酵技術對(duì)農作物及農作物殘(cán)渣進行生物(wù)轉化提高其營養價值具有巨(jù)大經濟價值。現在食品和飼(sì)料行業對其利用越來越廣泛。如利用根黴菌對木 薯及木薯渣進行發(fā)酵以提高其營養價值(zhí);利用白腐菌或黃孢原毛(máo)平革菌(jun1)對木質纖維素進行降解(jiě);利用木黴發酵棕櫚提高其在飼料行業的利用(yòng)率。

2.2  生物燃料

用農業、工業殘渣固態(tài)發酵生產生物燃料可大致分為兩大類(lèi):氣體和液態生物燃料。對傳統沼氣進行淨化可得到(dào)新型生物(wù)燃(rán)料;生物製氫是一(yī)個相對較新 的(de)生物燃料的氣體類型,由氫細菌、產酸和產(chǎn)甲烷細菌聯合厭氧發酵農工業廢物。液體生物燃料最近被分為生物乙醇和生物柴油。由於(yú)世界(jiè)能源(yuán)危機生物乙醇表現出 了振奮人心的重要(yào)性,生物柴油作為石(shí)油的(de)潛在替代品不斷得到發展(zhǎn)。利用(yòng)固態發酵方法生產生物乙(yǐ)醇有可消除糖的製備過程,節省成本;降低發酵罐體積,無(wú)廢 水(shuǐ);降低能耗等優點,發酵過程由酵母產生的轉化酶和酒(jiǔ)化酶對天然原料(如甜菜、蘋果渣(zhā)、甜高(gāo)粱和木薯(shǔ)等(děng))進行轉化。與酒精不同(tóng),生物(wù)柴油是一種酯,生物發 酵提(tí)取的乙(yǐ)基或甲基酯可(kě)以與傳統柴油混合或(huò)100%地作為生物柴油使用。Amin等用微(wēi)藻處理工業廢水生產藻油取得突破性進展,藻(zǎo)油經簡單處理即可作(zuò)為生 物柴油。

2.3  生物防治

生物防治是一種既(jì)不汙染環境,又可殺死害蟲(chóng)或病菌(jun1)的辦法,是利用有益生物或其他生物來抑製或消滅有害生物的一種防治方法,常見的有(yǒu)應用真菌、細 菌、病毒和能分泌抗生物質的抗生(shēng)菌(對人體和環境不產生公害)。利用固態(tài)發酵生產真菌殺蟲劑,藥物對害蟲的毒(dú)力得到極(jí)大的提高。如早期的白僵菌、蘇雲金杆 菌殺蟲;又如(rú)假單(dān)孢杆菌(jun1)、哈慈(cí)木黴和綠色木黴(méi)複合使用能最大(dà)限(xiàn)度地(dì)抑製尖孢鐮刀菌香蕉轉化型。使用固態發酵微(wēi)生(shēng)物肥(féi)料能減輕西瓜、黃瓜連作障礙(ài)。

2.4  垃(lā)圾處理

目前國、內外城(chéng)市垃圾處理主要采用(yòng)填埋、焚燒、發酵(jiào)等(děng)方法,其中填埋技術占地麵積大,不易降解;采(cǎi)用垃(lā)圾焚燒技術,其減量(liàng)化程度高,但投資(zī)巨大 且受(shòu)到煙氣排放的製約;發酵技術具有(yǒu)減容、減量及無害化程度低(dī)及可再循環利(lì)用等優點成為國內外垃圾處理方麵的首選。利(lì)用固態發酵技術加工處理生活垃(lā)圾,不 但解決了資源短缺等問題,同時降低了垃圾排放。德國Eggersmann公司采用Horstmann隧道倉發酵(jiào)係統對分類收集的有機垃圾、不含重金屬等工 業有害物(wù)進行(háng)處理,生產高等級的有機肥料,處理能力為7。3萬(wàn)t/年。西班牙巴塞羅那的(de)ECOPARE垃圾綜合處理廠采用垃圾前分選、好氧堆(duī)肥、厭氧發 酵、沼氣發電等工藝可處理城市混合垃圾和餐(cān)館垃圾,日綜處理能力為1050。t加拿大Edmonton處理廠采用滾筒發(fā)酵工(gōng)藝技術,每年生產12。5萬t 腐熟堆肥。中國廣東省博(bó)羅縣采用分選、有(yǒu)機垃圾發酵(jiào)、肥料加工、可燃物熱(rè)解、氣化發(fā)電(diàn)、無機垃圾填(tián)埋(mái)等工藝相結合的係統集(jí)成技術(shù)對生活(huó)垃圾進(jìn)行(háng)處理,生產 有機(jī)複混肥。

2.5  生物修複

固態發酵生物技術是有毒化合物生物降解與

環境生物修複的有益工(gōng)具。如國家海洋局第三研究所學者利用太平洋深海紅球菌(Rhodococcussp。TW53)修複石油汙(wū)染海水和湖(hú)水, 石油的分解率達到(dào)90%,同(tóng)時收集菌體還可(kě)得到富含(hán)FA的油(yóu)脂59。18%。利用(yòng)P。ostreatus對含有咖啡因的物(wù)質進行固態發酵進行生物修複可達 到對咖啡因(yīn)降解的目(mù)的。希臘(là)學者利用微生物去(qù)除垃(lā)圾填埋場(chǎng)中的腐植酸,去除率(lǜ)可達85%以上。

 

轉自河南工業大學學(xué)報 ( 自然(rán)科學版 ) 第 3 2卷第 1 期《現代固態發酵技術工藝、設備及應用研究進展(zhǎn)》作者:李浪、楊旭、薛(xuē)永亮


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